IDENTIFICATION AND CHARACTERIZATION OF TWO STRAINS CAUSING HEREQUE (RALSTONIA SOLANACEARUM RACE 2) IN MUSACEAE (AAA) FROM ARAGUA STATE, VENEZUELA.
Darío A. Torrealba Vargas*1 Irmarú Z. Torres Perdomo1 Maximiliano Méndez Morales2
Glenda Y. Aponte Parra3 Mingrelia J. España Zarate1 José D. Rosales Rangel1
Sandy L. Molina Moret1
1Profesional de Investigación, Laboratorio de Biología Molecular, Dirección de Agricultura y Soberanía Alimentaria, Fundación Instituto de Estudios Avanzados (IDEA), Carretera Hoyo De La Puerta – El Placer, Sector Sartenejas, Caracas 1080. Baruta, Venezuela.
2Facultad de Agronomía, Universidad Central de Venezuela (UCV), Av. Universidad, vía El Limón. Maracay, Venezuela.
3Profesional de Investigación, Unidad de Protección Vegetal Instituto Nacional de Investigaciones Agrícolas, Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias (INIA – CENIAP). Av. Universidad, vía El Limón, Edif. INIA, Código Postal: 2105. Maracay, Venezuela.
*Correo electrónico: tdario@gmail.com
Recibido: 04/09/2023 Aceptado: 02/11/2023 Publicado:
RESUMEN
La especie Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi, raza 2, causante del hereque o moko bacteriano en las musáceas, constituye una unidad taxonómicamente compleja que exhibe una amplia diversidad genética, fisiológica, serológica y de rango de hospedantes. Es por ello que se planteó identificar y caracterizar dos cepas (R4 y R5) seleccionadas por su patogenicidad. Para esto, se procesaron 27 muestras de 10 plantas sintomáticas de las que se obtuvieron colonias de forma irregular, elevación plana, aspecto mucoide, bordes gruesos, color crema y pigmentación central rojiza de diferentes intensidades (Fig. 1), usando medios de cultivo selectivos como el agar nutritivo y tetrazolio. Las observaciones al microscopio determinaron la presencia de colonias puras, caracterizadas como Gram Negativas con bastones rectos y curvos. Las pruebas de patogenicidad realizadas en plantas sanas, inoculadas con las dos cepas por infiltración, dieron como resultado la sintomatología característica de la enfermedad.

Fig.1. características morfológicas de las colonias de Ralstonia solanacearum.
Para la identificación molecular se utilizaron los iniciadores universales U1 y U2, los cuales amplificaron una banda de 996 pb que, al secuenciarla y compararla con la base de datos del GeneBank®, revelaron 80,58% de identidad y 92% de cobertura en el aislado R4, y 81,74% de identidad y 82% de cobertura para el aislado R5. Además, se utilizaron los iniciadores específicos, OLI1 y Y2 que amplificaron una banda de 288 pb lo que permitió identificar las muestras estudiadas como R. solanacearum. (Fig.2)

Fig. 2. Producto de la PCR con iniciadores específicos Oli1 y Y2.
Estos aislados podrán ser utilizados en distintos programas de mejoramiento para buscar tolerancia al mencionado patógeno y generar estrategias para el manejo integrado de la enfermedad.
Palabras clave: inoculación, marcadores moleculares, Musa sp., Ralstonia solanacearum
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